?食用菌味道鮮美,不僅具有高蛋白、低脂肪、低熱量的特點,素有“素中之葷”之稱,且富含多糖、膳食纖維等多種功能性物質,在抗腫瘤、增強免疫力、*********血脂、抗衰老等方面作用明顯。
?
我國是食用菌生產(chǎn)、出口大國,占全世界總量的六成以上。目前,我國食用菌加工主要分為初加工(干制、鹽漬、罐藏等)和深加工。而據(jù)加工企業(yè)測算,每加工1kg菇類,初加工后其產(chǎn)值可以增加2-3倍,深加工可以增加10-20倍。綜合考慮經(jīng)濟效益和市場需求,食用菌深加工技術和產(chǎn)品將成為未來的主要發(fā)展方向。
?
生物酶技術是基于酶解作用選擇性破壞植物細胞壁,使植物細胞內的成分更容易溶解、擴散,具有成分浸出率高、減少熱敏成分損失、降低能耗、減少污染、簡化工藝等優(yōu)勢,廣泛應用于食品工業(yè)、飼料工業(yè)、紡織和洗滌等。
?
將生物酶技術應用于食用菌深加工,不僅可以有效破壞食用菌細胞壁的致密結構,提高多糖、蛋白質等功能物質溶出,而且也可酶解大分子物質為小分子物質,以便擴散、去雜,改善產(chǎn)品風味。因此,總結國內外應用生物酶技術在食用菌深加工方面的研究進展,將有助于這方面的研究工作。
?
一、生物酶技術
酶是由生物體活細胞產(chǎn)生的一類具有特殊催化活性作用的蛋白質,能夠參與和促進活體細胞內的各種代謝反應,具有催化效率高、高度專一性、催化條件溫和等特點。
?
目前,蛋白酶、果膠酶、纖維素酶、淀粉酶等酶制劑已經(jīng)實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn),并已廣泛應用于食品、醫(yī)藥、紡織、日用化工、造紙、工業(yè)洗滌廢水處理及飼料等各個領域,具有廣闊的應用前景。
?
雖然食用菌細胞中本身含有酶類,但憑借本身自溶遠遠不能達到理想的制備效果,只能依靠外加酶來實現(xiàn)高提取率。田龍研究外加酶對長根菇營養(yǎng)物質抽提效果時發(fā)現(xiàn),僅靠長根菇自身的酶類作用,可溶性固形物提取率、蛋白抽提率、蛋白水解率只達到55%、40%、15%,表明大部分有效成分提取不出來。
?
一方面,植物細胞壁是由纖維素、半纖維素、果膠質、木質素等物質構成的致密結構。在傳統(tǒng)熱水浸提的基礎上,根據(jù)細胞壁的組成情況,選用合適的外加酶,將細胞壁組成成分纖維素、半纖維素、果膠質等水解后破壞致密結構,從而使植物細胞內有效成分更容易溶解、擴散。
?
另一方面,細胞中的蛋白質、核酸等往往根據(jù)需要被分解為小分子的肽、氨基酸、核苷酸等,添加蛋白酶、磷酸二酯酶等也是很有必要的。另外,在提取制備一些如不可溶膳食纖維時,一些被認為無效的雜質如淀粉、果膠、蛋白質等物質的去除,均需要添加相應的酶對之進行降解。
?
?
二、生物酶技術在食用菌加工中的應用
1.纖維素酶的應用
纖維素酶是所有參與生物降解纖維素生成葡萄糖的一組酶的總稱,是起協(xié)同作用的多組分酶系,又稱纖維素酶系,主要包括內切β-葡萄糖苷酶、外切β-葡萄糖苷酶和β-葡萄糖苷酶。食用菌的細胞壁中,纖維素是主要成分之一,主要由β-D-葡萄糖以β-1,4糖苷鍵連接,通過三種酶的協(xié)同作用,切斷β-1,4糖苷鍵,生成纖維二糖等短鏈低聚糖、纖維寡糖和葡萄糖,從而破壞細胞壁的致密結構,促進細胞內有效成分溶出。
?
纖維素酶的使用,一方面提高了食用菌功能性成分的溶出率,另一方面也增加了其加工副產(chǎn)品的經(jīng)濟利用價值。凡軍民等采用纖維素酶提取杏鮑菇多糖時,提取率高達18.57%,比傳統(tǒng)水提取法多糖提取率8.29%高出1.24倍。同時酶法提取還縮短操作時間,減少料液比和降低提取溫度,從而節(jié)省能源并避免高溫對多糖成分的破壞。
?
王安建等利用纖維素酶對香菇副產(chǎn)品香菇柄進行嫩化處理,研究表明,纖維素酶可以有效改善富含粗纖維的香菇柄的口感嚼勁和組織形態(tài)。而肖玲玲等則利用纖維素酶降解廢棄香菇柄中的大量纖維素,以酶解液中的還原糖供酵母發(fā)酵,釀造新型香菇醋。
?
另外,纖維素酶還具有增香的作用。李平等將β-葡萄糖苷酶添加于美味牛肝菌子實體和深層發(fā)酵液中,發(fā)現(xiàn)酶解后主要組分均未改變,但子實體新增17種化合物,其中苯乙酮含量增加了124.78%,而發(fā)酵液則新增19種化合物,如香氣貢獻較大的糠醛、順茉莉酮、胡椒酮、(Z,E)-法呢醛、(Z,Z)-法呢醛等。因而β-葡萄糖苷酶能夠有效改良美味牛肝菌子實體及其深層發(fā)酵液中的揮發(fā)性物質組分,具有強化風味的效果。
?
2.蛋白酶的應用
蛋白酶是一類能水解蛋白質肽鍵的酶的總稱。在食用菌加工中,目前常用的蛋白酶包括木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、風味蛋白酶等。一方面,食用菌的細胞壁和細胞膜中含有蛋白質,因而蛋白酶能通過降解蛋白質破壞細胞壁和細胞膜,從而提高目標物質得率。另一方面,細胞中的蛋白質可經(jīng)過酶降解成為分子量較小的活性寡聚肽、氨基酸等方便擴散到細胞外,利于后續(xù)提取、除雜。
?
木瓜蛋白酶是一類巰基蛋白酶,對動植物蛋白質、多肽等有較強的水解能力,既能把大分子蛋白質水解成小分子多肽或氨基酸,有利于釋放出食用菌多糖等功能性成分,又能把蛋白質水解物再合成具有活性功能的肽類物質。
?
劉青娥研究秀珍菇多糖提取酶解方法時發(fā)現(xiàn),經(jīng)木瓜蛋白酶酶解后多糖提取率比直接水提法提高了95%,遠高于果膠酶的79%和纖維素酶的42%,比傳統(tǒng)熱水浸提法提高了2倍,因而木瓜蛋白酶更適合于秀珍菇多糖的提取。同時,酶解液也具有食用菌多糖的免疫功能。
?
中性蛋白酶是一類在中性(pH6.0-7.5)條件下作用于蛋白質肽鍵的一類蛋白酶,可將蛋白質水解成氨基酸、多肽以及游離氨基酸,在提取食用菌中不溶性膳食纖維時能很好地起到去除蛋白質、提高得率的作用。
?
風味蛋白酶是內切酶和外切酶的混合酶,可有效地從蛋白質末端切除疏水氨基酸,使末端疏水氨基酸游離,以降低苦味等不良風味,多與其他蛋白酶復合使用制備多肽等。
?
3.果膠酶的應用
果膠酶是一個由果膠水解酶、果膠裂解酶、果膠酯酶和原果膠酶等組成的多酶復合體系,通過裂解或β消去作用切斷果膠質中的糖苷鍵,使果膠質分解為多聚半乳糖醛酸的一類酶。果膠質不僅與纖維素、半纖維素、木質素等構成食用菌細胞壁的堅硬結構,也沉積于細胞間質中。因此,果膠酶不僅能破壞細胞壁,同時亦可以降低溶液黏度,從而促進細胞內有效成分溶出與提取。
?
陶靜等研究猴頭菇酶解時發(fā)現(xiàn),果膠酶處理后,溶液中固形物含量從36mg/g升高到88mg/g,效果優(yōu)于其他三種細胞破壁酶(纖維素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶)。另外,研究發(fā)現(xiàn),長裙竹蓀的果膠酶酶解液也具有了一定的抑菌活性。
?
4.其他酶的應用
5′-磷酸二酯酶能將菇體細胞中RNA降解為5′-核苷酸,不僅增加一定的藥理作用,而且5′-鳥苷酸、5′-肌苷酸等也是重要的呈鮮味物質,從而增加風味。王小紅利用5′-磷酸二酯酶酶解雙孢蘑菇核酸時得到胞苷酸11.31μg/mL、腺苷酸為6.78 μg/mL、鳥苷酸8.37 μg/mL、尿苷酸6.40μg/mL,核酸酶解率達到68.1%。
?
β-葡聚糖酶可將葡聚糖降解為低分子量片斷的還原糖、寡糖,故常被用于降解主要由線性β-1,3-D-葡聚糖構成的茯苓,以更易水溶的低分子可溶性茯苓多糖。在提取食用菌的膳食纖維時,也常常用到淀粉酶,以去除雜質淀粉。
?
5.復合酶的應用
在食用菌深加工中,常常引入復合酶解技術。李琴等研究酶解處理對雙孢蘑菇湯營養(yǎng)成分和揮發(fā)性物質影響時發(fā)現(xiàn),食用菌水解酶(由纖維素酶、蛋白酶、風味酶組成的復合酶)處理后酶解液中固形物含量增加了42.6%,而分步加酶處理時僅增加了15%,同時食用菌水解酶酶解液中蛋白質回收率及游離氨基酸總量也多,說明復合酶的協(xié)同作用使雙孢蘑菇細胞壁更易破碎,細胞內的蛋白質更易溶出。
?
Zhu等結合響應面法優(yōu)化復合酶(纖維素酶∶果膠酶∶胰蛋白酶=2∶2∶1)輔助提取猴頭菇多糖時發(fā)現(xiàn),在pH5.71,52.03℃下酶解33.79min后猴頭菇多糖的收率達13.46%,不僅與傳統(tǒng)熱水浸提法的所得多糖官能團相同,而且得率比后者高8.03%。Yin等采用復合酶(木瓜蛋白酶∶果膠酶∶纖維素酶=1∶1∶1)提取松茸多糖,得率也達到了7.53%。
?
6.生物酶技術與其他技術的聯(lián)用
?
為了進一步提高食用菌深加工中產(chǎn)品的得率,也常常將生物酶技術與超聲波、化學法、膜分離等技術聯(lián)合使用。臧晉等通過超聲波200 W處理30min借助其強烈的振動引起細胞漿流動、細胞震蕩、旋轉、摩擦,加速有效成分溶解,并改變細胞壁的通透性,加速胞內物質的擴散釋放,而后再添加酸性蛋白酶對香菇進行酶解后,該酶解液加工的香菇醬中氨基酸含量可達0.88%。
?
膜分離技術是一項兼具分離、濃縮、純化的分離新技術,一般根據(jù)孔徑大小依次分為微濾、超濾、納濾和反滲透四種,具有分離、能耗低、常溫工作、連續(xù)性好等特點,已廣泛應用于食品、水處理、醫(yī)藥等方面。在食用菌深加工中,不僅可利用膜分離技術對酶解液中的有效成分進行富集濃縮,也可以除去酶解過程中產(chǎn)生的不良因子。
?
三、展望
食用菌是世界衛(wèi)生組織公認的機能因子型保健食品,著名食用菌學家、香港中文大學張樹庭教授更將其價值高度概括為“可食可補可藥”。
?
目前,對食用菌進行深加工,開發(fā)食用菌中的有效活性成分,提高其附加值已經(jīng)成為國內外市場競爭的焦點所在。生物酶技術因其率、條件溫和、低能耗、低污染、簡化工藝等優(yōu)勢,已經(jīng)在部分食用菌深加工中得到較快發(fā)展。但是,并沒有形成一套較為系統(tǒng)的應用體系,多數(shù)仍停留在實驗室水平。
?
已有相關研究表明,工業(yè)酶制劑于商業(yè)食用菌膳食纖維生產(chǎn)上與分析用酶效果類似。因此,生物酶技術在食用菌深加工方面具有巨大商業(yè)潛力。
?
但是,生物酶技術也存在一定的缺陷。
一方面,反應條件對酶解效果有極大限制,且固定化酶重復利用率普遍不高,這就造成酶成本偏高。
?
另一方面,食用菌深加工中生物酶技術應用研究不完善,工藝不成熟。因而,生物酶技術在食用菌深加工中的進一步發(fā)展需要做到以下方面:
?
①加大產(chǎn)酶微生物的篩選和培育,降低生產(chǎn)成本,開發(fā)出高酶活、適應范圍廣的酶制劑。
?
②開發(fā)、廉價、通透性好、性能穩(wěn)定、安全******的載體以及簡便易行的固定化方法,提高固定化酶的性質、穩(wěn)定性和應用范圍。
?
③增強生物酶技術在食用菌功能性成分提取工藝中的應用研究,并建立酶解液中的殘留酶檢測指標,以保證提取液的穩(wěn)定性與質量。
?
總之,生物酶技術在我國食用菌深加工中具有廣闊的應用前景和市場潛力。